1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

 

彈性石英毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25μm）SE-54（或DB-1701）；63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進(jìn)樣口溫度：230℃；檢測器溫度：300℃；不分流進(jìn)樣。程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘。理論板數(shù)按α-BHC峰計算應(yīng)不低于106，兩個相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。

 

2、對照品儲備液的制備

 

精密稱取六六六（BHC）〔α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC〕、滴滴涕（DDT）〔PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT〕及五氯硝基苯（PCNB）農(nóng)藥對照品適量，用石油醚（60～90℃）分別制成每1ml約含4～5μg的溶液，即得。

 

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀釋至刻度，搖勻，即得。

 

3、混合對照品溶液的制備

 

精密量取上述混合對照品儲備液，用石油醚（60～90℃）制成每1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。

 

4、供試品溶液的制備藥材

 

取供試品于60℃干燥4小時，粉碎成細(xì)粉，取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，加丙酮40ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補(bǔ)足減失的重量，再加氯化鈉約6g及二氯甲烷30ml，稱定重量，超聲處理15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，靜置（使分層），將有機(jī)相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時，精密量取35ml，于40℃水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醚（60～90℃）如前反復(fù)操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚（60～90℃）溶解并轉(zhuǎn)移至10ml具塞刻度離心管中，加石油醚（60～90℃）至5ml，小心加入硫酸1ml，振搖1分鐘，離心（3000轉(zhuǎn)/分）10分鐘，精密量取上清液2ml，置具刻度的濃縮瓶（見圖）中，連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，40℃下（或用氮氣）將溶液濃縮至適量，精密稀釋至1ml，即得。

 

5、制劑取供試品，研成細(xì)粉（蜜丸切碎，液體直接量?。?，精密稱取適量（相當(dāng)于藥材2g），以下按上述供試品溶液制備法制備，即得供試品溶液。

 

6、測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應(yīng)濃度的混合對照品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標(biāo)法計算供試品中9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量。

 

二、有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測定

 

1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

 

彈性石英毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）DB-17MS（或HP-5）；氮磷檢測器（NPD）；進(jìn)樣口溫度：220℃；檢測器溫度：300℃；不分流進(jìn)樣；程序升溫：初始120℃，每分鐘10℃升至200℃，每分鐘5℃升至240℃，保持2分鐘，每分鐘20℃升至270℃，保持0.5分鐘。理論板數(shù)按敵敵畏峰計算應(yīng)不低于6000，兩個相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。

 

2、對照品儲備液的制備

 

精密稱取對硫磷、甲基對硫磷、樂果、氧化樂果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷農(nóng)藥對照品適量，用醋酸乙酯分別制成每1ml約含100μg的溶液，即得。

 

混合對照品儲備液的制備精密量取上述各對照品儲備液1ml，置20ml棕色量瓶中，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，即得。

 

混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品儲備液，用醋酸乙酯制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的濃度系列，即得。

 

3、供試品溶液的制備藥材

 

取供試品粉末（過二號篩）5.0g，加無水硫酸鈉5g，加入醋酸乙酯50～100ml，冰浴超聲處理3分鐘，放置，取上層液濾過，藥渣加醋酸乙酯30～50ml，冰浴超聲處理2分鐘，放置，濾過，合并兩次濾液，用少量醋酸乙酯洗滌濾紙及殘渣，與上述濾液合并。取濾液40℃下減壓濃縮至近干，用醋酸乙酯轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱〔120～400目，0.25g，內(nèi)徑0.9cm（如Supelclean

 

ENVI-CarbSPETubes，3ml活性炭小柱），用醋酸乙酯5ml預(yù)洗〕上，置多功能真空樣品處理器上，用正己烷﹣醋酸乙酯（1:1）的混合液5ml洗脫,收集洗脫液,置氮吹儀上濃縮至近干，精密加入醋酸乙酯1ml使溶解，即得。

 

4、測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應(yīng)濃度的混合對照品溶液各1μl，分別注入氣相色譜儀，按外標(biāo)法計算供試品中12種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。