色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標(biāo)，混合物能否在色譜柱中得到分離，除取決于選擇合適的固定相外，還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。在一定的色譜操作條件下，色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數(shù)愈多，或塔板高度愈小，色譜柱的分離效能愈好。如何對柱效進行評價

 提高液相色譜柱柱效的方法

（1）降低移動相的流速,但會使分析時間延長。

（2）減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

（3）減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。

（4）選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。

（5）適當(dāng)提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。

（6）盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。

    從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到*的工作條件。

對柱效值進行跟蹤測算應(yīng)注意的問題  

    我們也應(yīng)記住柱效值并不足以預(yù)測在所有條件下的柱性能，對大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。

幾種測量和計算柱效值的方法

    因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效（以理論塔板數(shù)n為單位）的公式習(xí)慣上定義為：式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從測峰寬的基線量起）有關(guān)的常數(shù),ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。

    假如一個色譜峰真是正態(tài)峰型,那么每種計算方法都會得到同樣的結(jié)果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質(zhì),由于柱內(nèi)的槽或空隙,也會出現(xiàn)非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的高處測量,計算的理論塔板數(shù)值就越大（準(zhǔn)確性越低）。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個峰型（包括拖尾）的柱效值,同時為了保證定量的重復(fù)性,也需要色譜峰很好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性zui敏感的計算方法。如果目的僅僅是要監(jiān)測色譜柱從*次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效,那么以上任何一種方法都可以,應(yīng)選擇zui簡便的方法。

*、柱子溫度能調(diào)高，第二、可選柱子內(nèi)徑小。第三、柱外體積小更妙，第四、使用超純的硅膠。第五、氘燈要選能量高，第六、采用中空透光燈。第七、改變有機相比率，第八、流動相pH可鼓搗。第九、可把鍵合相選挑，第十、改變有機添加劑。十一、改變流動相配比，十二、縮短檢測響應(yīng)時間。